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培养的肥厚心肌细胞中RhoA/ROCK通路和ERK通路的相互对话

Interaction between RhoA/ROCK pathway and ERK pathway in cultured hypertrophy cardiomyocyts

摘要目的:探讨心肌肥厚(cardiac hypertrophy,CH)心肌细胞中RhoA(ras homologue A)/ROCK(Rho相关激酶)通路和细胞外信号调节蛋白激酶(extra cellular signal regulated protein kinase,ERK)通路是否存在相互作用.方法:原代培养的大鼠乳鼠心肌细胞,分为四组:对照组、RhoA组、ERK阻断剂(PD98059)组和RhoA+ERK阻断剂(PD98059)组.分别采用Western blotting法检测CH心肌细胞中ROCK、ERK1/2蛋白表达及磷酸化ROCK(p-ROCK)、磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)蛋白含量,逆转录PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR)方法测CH心肌细胞中ROCK蛋白的表达.结果:与对照组相比,RhoA组p-ROCK、p-ERK1/2蛋白含量增多(P<0.05),ERK阻断剂组p-ROCK蛋白含量无差异、p-ERK1/2蛋白含量减少(P<0.05),RhoA+ERK阻断剂组p-ROCK、p-ERK1/2蛋白含量无差异;与RhoA组相比,RhoA+ERK阻断剂组p-ROCK、p-ERK1/2蛋白含量减少(P<0.05).各组间ROCK、ERK1/2蛋白表达无差异.各组的ROCK mRNA表达差异显著.结论:RhoA可直接活化ROCK蛋白和ERK1/2通路,ERK1/2通路可能位于RhoA/ROCK通路的下游,ROCK蛋白的活化作用可能部分依赖于ERK1/2通路的激活.