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人骨髓间质干细胞分离、培养、分化和鉴定方法的研究

摘要目的 探讨人骨髓间质干细胞(hMSCs)分离和体外培养的适宜条件,检测其多向分化的能力.方法 应用细胞生物学干细胞培养法、分子生物学干细胞组织工程学等方法研究hMSCs的分离、培养并检测其多向分化潜能.结果 hMSCs增殖能力在一定的范围内(2.5%~20%)随着血清浓度的增加而增大,20%的血清浓度最适宜,其增殖活性在一定种植密度范围内(1~8×10~4/ml)随种植细胞数量增加而增高,在种植细胞密度为8×10~4/ml时,细胞的增殖活性最高.所分离、培养的hMSCs是纯的、可长期传代、扩增的稳定的细胞.hMSCs在成脂培养基中有脂肪细胞形成,苏丹Ⅲ染色法将脂肪细胞胞浆染成桔红色.在成软骨培养基中有软骨细胞形成,阿尔新蓝染色法将软骨结节样结构染为深蓝色.在成骨培养基中有成骨细胞形成,Von Kossa染色法显示有黑色矿化结节形成.该细胞在特定的诱导培养条件下具有向脂肪细胞、软骨细胞、成骨细胞分化能力,符合判定hMSCs的"金标准".结论 所分离、培养的hMSCs是纯的、可长期传代、扩增并保持未分化状态的、稳定的细胞,其在体外诱导条件下可向脂肪细胞、软骨细胞、成骨细胞分化,是一种具有多向分化潜能的细胞.

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DOI 10.3969/j.issn.1005-9202.2009.19.030
发布时间 2010-03-19(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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中国老年学杂志

中国老年学杂志

2009年29卷19期

2491-2493页

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