脂多糖对原代大鼠腹膜间皮细胞IL-1β和IL-6表达的影响
Effect of lipopolysaccharide on the expressions of IL-1βand IL-6 in rat peritoneal mesothelial cells
摘要目的:研究原代腹膜间皮细胞( PMCs)对不同浓度脂多糖( LPS)刺激的反应效果,探讨术后腹腔粘连体外细胞最佳造模方法。方法运用不同浓度LPS于不同时间点刺激PMCs,ELISA法检测各组细胞上清液中白介素( IL)-1β、IL-6蛋白含量,qRT-PCR检测 IL-1β、IL-6 mRNA水平,扫描电镜观察LPS刺激前后PMCs的活性变化情况。结果 ELISA测得各组大鼠PMCs培养上清液IL-1β和 IL-6浓度随着培养时间推移和 LPS浓度增加而表现出明显差异(P<0.01),尤其以24 h、10μg/ml为LPS最佳刺激时间和最佳刺激浓度;qRT-PCR实验中 LPS最佳刺激时间为24 h,但是最佳刺激浓度为5μg/ml;正常PMCs扫描电镜下表面被丰富的微绒毛覆盖;LPS刺激后 PMCs剥脱、肿胀明显,具有细胞间隙,偶见基底膜。结论LPS能够刺激大鼠PMCs诱发炎症损伤,进一步放大炎症反应,模拟术后腹腔粘连微环境,作为术后腹腔粘连体外细胞模型。
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