换一批人白细胞介素10基因慢病毒载体的构建及重组
The construction of recombinant lentiviral-vector with human interleukin-10 gene
摘要目的 拟构建含人白细胞介素10(hIL-10)基因的慢病毒载体(LV-hIL-10),为进一步探讨慢性疼痛的治疗研究奠定基础.方法 从pCYIL-10质粒中选择适当的引物进行PCR后得到含Pme I 多功能酶切位点的IL-10 基因片段,将其构建到慢病毒载体pWPXL上得到重组的pWPXL- IL-10质粒,对所抽提的质粒进行酶切及测序检测正确后大量提取备用.将重组质粒pWPXL- IL-10、包膜质粒pMD2.G和包装质粒psPAX2共转染293T细胞后包装出复制缺陷的慢病毒颗粒,进行病毒滴度的测定.结果 重组质粒酶切鉴定结果显示,pWPXL- IL-10质粒中有一个530 bp左右的插入片断,大小与IL-l0 cDNA(534 bp)基本符合.测序结果显示pWPXL- IL-10质粒上插入片段的序列与基因库中hIL-10基因序列完全一致.转染后获得了高滴度(2×1010)、高纯度的病毒颗粒.结论 成功构建了含人白细胞介素10基因的慢病毒载体LV-hIL-10,为慢性疼痛治疗的研究奠定了基础.
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DOI
10.3969/j.issn.1005-6947.2008.08.015
发布时间
2008-11-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
湖南省自然科学基金（06JJ4122）
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