等位基因特异PCR技术检测结核分支杆菌rpoB基因突变研究
Developmmt of an Allele Specific PCR for Detection of rpoB Gene Mutations Associated with the resistance of Myco-bacterium tuberculosis to Rifampin
摘要目的建立并评价等位特异多聚酶链反应检测结核分支杆菌耐利福平基因rpoB突变的方法.方法设计与rpoB基因突变后的碱基配对的引物用于扩增突变基因,建立AS-PCR检测rpoB基因突变的方法,并对58株结核菌进行了检测.结果AS-PCR检测结核菌耐利福平相关基因rpoB的敏感性为77.3%,特异性达91.7%.AS-PCR检测rpoB基因,有1628A→T、1657C→T,G和1673C→T突变分别占耐利福平结核菌株的18.2%,22.7%和36.4%.检测rpoB突变与MIC测定RFP耐药率和PCR-SSCP检测的总符合率分别为86.2%和74.1%.检测试验可在3~4h内完成.结论AS-PCR方法是检测结核菌耐利福平基因突变的敏感和快速方法,可在临床实验室使用并为临床医师提供治疗依据.
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