换一批Mac-1-FP融合表达载体的构建、Mac-1-FP的表达与活性鉴定
Construction of Mac-1-FP Expression Vector, Expression of Mac-1-FP and Its Characterization
摘要分别构建表达BFP与CD11b的C末端、YFP与CD18的N末端相连接的融合蛋白的表达载体,并将二者转染至既无内源性Mac-1的表达同时又具有某些炎症反应信号转导系统的CHO细胞株进行表达Mac-1-FP.通过荧光显微镜观察到共转染后的CHO细胞可发出蓝色荧光和黄色荧光,应用Western印迹方法确定CD11b-BFP与YFP-CD18能够形成二聚体,采用流式细胞术检测确定PMA刺激Mac-1-FP可由胞浆内转位至膜上,测定PMA刺激前后的转染CHO细胞与其配基ICAM-1粘附活性的变化,证明转染CHO中的Mac-1-FP表达成功并具有野生型Mac-1的形成二聚体、膜转位、和配基ICAM-1相结合等功能,为进一步研究白细胞表面粘附分子Mac-1的α亚基CD11b、β亚基CD18在细胞内的走向及归宿创造了条件.
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分类号
Q73（生物膜的结构和功能）
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1007-7626.2003.06.013
发布时间
2004-02-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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