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与乳腺癌细胞MCF-7相关的旋毛虫TS498基因的克隆与表达

Cloning and expression of TS498 gene of breast cancer MCF-7 cells-associated Trichinella spiralis

摘要目的 克隆与乳腺癌MCF-7细胞相关的旋毛虫TS498基因,并进行原核表达.方法 从含TS498基因的噬菌体文库中PCR扩增TS498基因,亚克隆人原核表达载体pET-28a(+)中,构建重组表达质粒pET-28a-TS498,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western blot分析表达产物.结果 扩增的旋毛虫TS498基因与GenBank中登录的基因序列同源性为100%,重组表达质粒pET-28a-TS498经双酶切和测序证明构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约23 000,表达量约占菌体总蛋白的20%,能够被兔抗旋毛虫肌幼虫阳性血清识别.结论 成功克隆并在大肠杆菌中表达了与MCF-7细胞相关的旋毛虫TS498基因,为进一步研究其特性和功能奠定了基础.

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