基于MEK/ERK信号通路探讨阳和汤含药血清对乳腺癌4T1细胞的影响
Effect of Yanghetang-containing Serum on Breast Cancer 4T1 Cells Based on MEK/ERK Signaling Pathway
摘要目的:通过阳和汤含药血清干预小鼠乳腺癌4T1细胞,探索阳和汤对乳腺癌4T1细胞及其内丝裂原活化蛋白激酶(MEK)/细胞外调节蛋白激酶(ERK)信号通路的影响.方法:制备阳和汤SD大鼠含药血清.将其随机分组为空白组、阳和汤低、中、高剂量组(5.8、11.6、23.2 g·kg-1),空白组用生理盐水代替.各组按10%含药血清和90%RMPI 1640完全培养基均匀混合,干预细胞.采用细胞增殖与活性检测(CCK-8)法分别在24、48、72 h检测阳和汤含药血清对4T1细胞增殖的影响;采用流式细胞术检测4T1细胞的凋亡情况;采用划痕实验检测4T1细胞迁移情况;采用Transwell实验检测细胞侵袭能力;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测MEK1/2、磷酸化(p)-MEK1/2、ERK1/2、p-ERK1/2、大鼠肉瘤病毒(RAS)蛋白的表达水平.结果:与空白组比较,阳和汤干预24、48、72 h,阳和汤含药血清低、中、高剂量组对4T1细胞增殖具有明显抑制作用(P<0.05,P<0.01);阳和汤干预48 h,阳和汤含药血清低、中、高剂量组细胞凋亡率显著升高(P<0.01);阳和汤含药血清低、中、高剂量组在24、48h的细胞划痕愈合能力显著降低(P<0.01);阳和汤含药血清低、中、高剂量组细胞侵袭能力显著降低(P<0.01);阳和汤含药血清低、中、高剂量组细胞内MEK1/2、ERK1/2表达差异无统计学意义,p-MEK1/2、p-ERK1/2、RAS蛋白表达显著降低(P<0.01).结论:阳和汤可抑制乳腺癌细胞4T1增殖、迁移、侵袭,促进其凋亡.其凋亡机制与MEK/ERK信号通路受抑制,p-MEK1/2、p-ERK1/2、RAS蛋白表达下调有关.
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