换一批基于试纸条核酸提取和重组聚合酶扩增技术的HPV 16型DNA纸基电化学发光快速检测方法
Rapid detection of HPV 16 DNA by paper-based electrochemiluminescence based on test strip nucleic acid extraction and recombinant polymerase amplification
摘要目的 建立一种人乳头瘤病毒(HPV)高危16亚型快速、灵敏、特异的检测方法.方法 采用前期构建的试纸条法提取样本HPV DNA,并以其为模板,使用电化学发光试剂(酯化钌)标记上游引物,生物素标记下游引物,进行重组聚合酶恒温扩增,通过亲和素化的磁微球将生物素标记的扩增产物,在磁场的作用下富集,通过纸基电极-电化学发光检测技术,获得有酯化钌标记的待测物的浓度信息.结果 酯化钌与上游引物以20:1的摩尔比可以获得更高的标记效率和发光强度,该法最低检出限为50 copies/mL,比实时荧光PCR的灵敏度高16倍;批内检测相对标准偏差低于5％,单个样本从核酸提取到获得扩增结果所需时间小于1 h,具有较好的特异性、灵敏度和重复性.结论 该法检测快速、灵敏、特异、操作简单,具有一定的临床应用价值.
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关键词
人乳头瘤病毒纸基核酸提取重组聚合酶扩增电化学发光human papillomaviruspaper-basednucleic acid extractionrecombinase polymerase amplificationelec-trochemiluminescence
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1007-4287.2023.09.001
发布时间
2023-10-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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