糖尿病中性粒细胞粘附分子表达与血小板微小颗粒的研究

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摘要篇首：当中性粒细胞受到活化时，表达粘附分子CD11/CD18、CD62L、CD44等，并与血管内皮细胞粘附，向血管外游走。高切应力作用下血小板释放具有促凝活性的微小颗粒［1］。血小板微小颗粒(PMP)与活化的凝血因子Va、Xa形成促凝血活酶复合物，促进血液凝固［2］。PMP与糖尿病动脉硬化有密切关系［3］。凝血调节素(TM)是内皮细胞损伤标志［4］。微血管损伤疾病中，TM水平明显增加［5］。然而，糖尿病中性粒细胞粘附分子、PMP、TM之间关系尚不清楚。本研究主要探讨糖尿病的中性粒细胞粘附分子、PMP、TM之间的关系。　　一、对象与方法　　1.对象：糖尿病患者20例(男11例，女9例，平均年龄35岁，均有微血管并发症)，正常人20例。　　2.方法：(1)采静脉血10 ml，用淋巴细胞分离液分离中性粒细胞，用1%甲醛固定。用免疫球蛋白阻滞Fc受体。用CD11a、CD11b、CD62L单克隆抗体孵育。用FITC荧光素标记，用流式细胞仪检测。(2)同上方法分离血小板之后，加入FITC标记的Ib/Ⅸ单克隆抗体，用流式细胞仪检测。计算104个血小板的微小颗粒。(3)用TM-MoAb20室温下包被微孔板，用含0.05% Tween 20的PBS洗涤，用含0.02% BSA和0.05% Tween 20的PBS室温孵育。加入检测标本，加入邻苯二胺，室温孵育。用1mol/L H2SO4终止呈色反应。用492nm测吸光度。