人骨髓间充质干细胞体外诱导分化为胰岛素分泌细胞的实验研究
Differentiation of human bone marrow mesenchymal stem cells(hBMSCs) into insulin-secreting cells
摘要目的 探讨联合应用高糖和胰升血糖素样肽-1(GLP-1)、活化素A、尼克酰胺和β细胞调节素(BTC)刺激体外能否诱导人骨髓间充质干细胞向胰岛样细胞分化.方法 分别用放射免疫法、RT-PCR和免疫细胞化学方法 检测胰岛素浓度、胰岛素mRNA表达以及相关蛋白的表达. 结果 (1)刺激后各组可分泌胰岛素量增加.(2)RT-PCR发现GLP-1组、活化素 A组、尼克酰胺组、共同刺激组和BTC组等均可产生约300bp的目的 片段,即胰岛素原基因的mRNA表达.(3)免疫细胞化学证实除了对照组外,各刺激组均有胰岛素表达;各刺激组均未表达胰升血糖素;除协同作用组有生长抑素的弱阳性表达外,其他各刺激组均未表达生长抑素;尼克酰胺组和协同作用组可见到巢蛋白的弱阳性表达.(4)高糖刺激胰岛素释放实验结果 显示,经联合高糖和GLP-1、活化素A、BTC、尼克酰胺和共同刺激诱导分化后,骨髓间充质干细胞(BMSCs)对高葡萄糖刺激有反应,能相应增加胰岛素的分泌量. 结论 联合高糖、GLP-1、活化素A、尼克酰胺和BTC等因子可以在体外诱导人BMSCs分化为胰岛素分泌细胞,但胰岛素分泌水平较低.
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