水飞蓟素改善棕榈酸引起的胰岛素抵抗及机制初步探讨
Silymarin ameliorates palmitic acid induced insulin resistance and its mechanism
摘要目的 评价水飞蓟素(Sil)对棕榈酸(PA)诱导HepG2细胞IR的作用并进一步揭示其机制. 方法 实验分为正常对照(NC)组,棕榈酸(PA)组,Sil干预低剂量(12.5 μmol/L,L-Sil)组、中剂量(25 μmol/L,M-Sil)组和高剂量(50 μmol/L,H-Sil)组.PA诱导HepG2细胞IR,分别给予12.5,25,50 μmol/L Sil作用6 h,测定葡萄糖消耗量,使用活性氧簇(ROS)试剂盒测定ROS活性水平.采用Western blot方法检测AKT以及还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶的NOX2、p67phox、p47phox蛋白表达水平. 结果 PA组与NC组比较,葡萄糖耗氧量降低[(41.2±6.1)% vs (100±12)%,P=0.0087],磷酸化AKT(p-AKT)蛋白表达量降低[(0.458±0.185)vs(1.00±0.13),P=0.0184],同时PA组ROS水平[(1567±189 vs(14±34)U/ml,P=0.0094]以及NAPDH氧化酶NOX2、p67、p47亚基的表达水平升高(P<0.05).Sil各组与PA组比较可增加葡萄糖消耗量[(52.8±8.4)% vs (62.2±6.5)% vs (82.3±9.8)%],差异有统计学意义(P=0.041、0.039、0.0076);H-Sil组磷酸化AKT(p-AKT)蛋白表达量提高(0.793±0.249),与PA组比较,差异有统计学意义(P=0.0395);Sil 可降低ROS水平[(1085±252) vs (851±184) vs (405±35)],与PA组比较,差异有统计学意义(P=0.047、0.023、0.0015),以及降低NAPDH氧化酶NOX2、p67、p47亚基的表达水平(P<0.05),且作用强度随Sil剂量的增加而增强. 结论 Sil可能通过降低NADPH氧化酶活性降低氧化应激,从而改善HepG2细胞的IR.
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