换一批
换一批环状RNA hsa_circ_0018103在高糖诱导脂肪干细胞中的表达及其对细胞自噬及凋亡的影响
Expression of circRNA hsa_circ_0018103 in ADSCs induced by high glucose and its effect on autophagy and apoptosis
摘要目的 探讨环状RNA(circRNA)hsa_circ_0018103在调节脂肪干细胞(ADSCs)修复DM创面中的作用.方法 选取2019年6～9月于徐州医科大学附属医院整形外科进行腹部皮脂切除术的3例患者,将3～5代细胞均匀混合,收取其ADSCs分别置于5.5 mmol/L葡萄糖(NC组)及25 mmol/L高糖(HG组)培养基中培养,分析两组circRNA表达谱,RT?qPCR确认目标circRNA为hsa_circ_0018103.将高糖诱导的ADSCs分别转染pcDNA(pcDNA组)和pcDNA?hsa_circ_0018103(pcDNA?hsa_circ_0018103组).RT?qPCR验证转染效率,自噬双标腺病毒(mRFP?GFP?LC3)感染细胞计数阳性斑点数量.流式细胞凋亡实验、TUNEL实验检测各组细胞凋亡,Western blot法检测各组细胞凋亡相关蛋白表达量.结果 根据测序结果及RT?qPCR验证,高糖诱导的ADSCs中hsa_circ_0018103是表达差异最显著的circRNA.与pcDNA组比较,pcDNA?hsa_circ_0018103组ADSCs中黄色阳性斑点增加(P<0.05),自噬相关蛋白5、酵母ATG6同源物、微管相关蛋白1轻链3表达升高(P<0.05),且凋亡率降低(P<0.05),与B细胞淋巴瘤蛋白质2(Bcl?2)相关的X蛋白(Bax)、Bcl?2样蛋白11表达降低(P<0.05),Bcl?2蛋白表达升高(P<0.05).结论 Hsa_circ_0018103在高糖诱导ADSCs中显著低表达,促进细胞自噬,抑制细胞凋亡.
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