换一批杭州市PM2.5对BEAS-2B细胞的生物学效应研究
Assessment of biological effects in BEAS-2B cells exposed to PM2.5 collected in Hangzhou City
摘要目的 观察杭州市不同地区PM2.5对人支气管上皮细胞(BEAS-2B)的生物学效应.方法 采集杭州市下城区和淳安县的PM2.5样品,通过超声冻干提取后将不同浓度PM2.5样品作用于BEAS-2B细胞,24 h后观察其生物学效应.用CCK-8法检测细胞活力,根据实验结果,将细胞分成空白对照组、25 μg/ml浓度组和100 μg/ml浓度组.采用γH2AX免疫荧光法和免疫印迹法分别检测γH2AX焦点损伤及γH2AX蛋白表达情况,免疫荧光实验采用平均焦点数和焦点阳性细胞率作为DNA损伤的评价指标;用DCFH-DA探针法观察细胞内ROS生成.结果 CCK-8实验结果显示,下城区和淳安县的PM2.5样品在25μg/ml、50 μg/ml、100 μg/ml、200 μg/ml和400μg/ml浓度时能显著降低细胞活力(P＜0.05),而2.5 μg/ml～10 μg/ml低浓度作用则未对细胞造成影响.用25μg/ml和100 μg/ml浓度PM2.5样品处理细胞后,细胞内γH2AX平均焦点数、焦点阳性细胞率、γH2AX蛋白以及ROS表达均有显著增加(P＜0.05).结论 PM2.5能使BEAS-2B细胞活力降低、细胞DNA损伤,具有一定的细胞毒性,并能使细胞内ROS表达增强.
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