换一批小反刍兽疫病毒N蛋白原核表达条件的优化及反应活性
Optimization of prokaryotic expression conditions and reactivity of N protein of Peste des Petits Ruminants Virus
摘要目的 探讨小反刍兽疫病毒(Peste des Petits Ruminants Virus,PPRV)N蛋白原核表达、条件优化及反应活性.方法 参照GenBank中PPRV (Nigeria/75/1)N基因序列,人工合成该基因,构建重组表达质粒pET-30a(+)-N,转化至BL21 (DE3)感受态细胞,IPTG诱导表达,进行SDS-PAGE电泳、Western-blot分析.在不同温度、时间、IPTG浓度条件下诱导表达N蛋白,确定最佳表达条件.结果 PPRV N蛋白(64.4 kD)成功表达,能被羊PPRV免疫血清所识别.N蛋白主要以包涵体存在,其最佳诱导条件:诱导温度28℃、IPTG终浓度2.0 mmol/L、诱导时间16 h.结论 原核表达的PPRVN蛋白具有良好的特异性和反应活性,为单克隆抗体的制备及快速诊断方法的建立提供了技术资料.
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分类号
S852.65+9.5
栏目名称
DOI
10.13381/j.cnki.cjm.201901007
发布时间
2019-03-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
:国家重点研发计划
防控体系研究项目（2017YFD0501800）
边境地区家养动物外来动物疫病监测溯源技术研究课题（2017YFD0501801）
新疆维吾尔自治区项目（PT1809）
新疆维吾尔自治区项目（2018D01A41）
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