换一批
换一批贮脂细胞反义TIMP1基因转移及对细胞外基质降解的促进作用
TIMP1 ANTISENSE GENE TRANSFER INTO ITO CELLS AND ENHANCED EXTRACELLULAR MATRIX DEGRADATION
摘要目的:探讨反义TIMP1基因对贮脂细胞及细胞外基质降解的作用及其意义.方法:将大鼠全长TIMP1 cDNA反向插入哺乳表达载体pCI-neo中,构建反义TIMP1基因真核表达载体,用脂质体介导的方法,将反义TIMP1基因导入贮脂细胞株CFSC-2G中,选择稳定转染的贮脂细胞培养,采用RT-PCR、原位杂交、免疫组化及RIA等方法,观察TIMP1 mRNA和蛋白、α1(Ⅲ)mRNA、FN蛋白表达及细胞培养上清中PCI、PCⅢ、HA、LN水平的变化.结果:反义TIMP1基因能明显地抑制贮脂细胞中TIMP1 mRNA和蛋白的高表达(P＜0.01).转基因细胞中α1(Ⅲ)mRNA、FN蛋白的表达与未转基因细胞比较无明显变化(P＞0.05).转基因后贮脂细胞培养上清中PCI、PCⅢ、HA、LN水平明显低于未转基因细胞(P＜0.01).结论:反义TIMP1基因可抑制贮脂细胞内源性TIMP1产生,促进细胞外基质的降解,为肝纤维化的逆转治疗提供了理论基础.
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