换一批
换一批人IL-15cDNA真核表达载体的构建及其在BEL-7402细胞中的表达
CONSTRUCTION OF EUKARYOTIC EXPRESSION VECTOR WITH HUMAN INTERLEUKIN-15 cDNA AND ITS EXPRESSION IN BEL-7402 CELLS
摘要目的:构建人白细胞介素-15(hIL-15)真核表达载体并在肝癌细胞BEL-7402中表达,为进一步研究IL-15的功能及临床应用奠定基础.方法:采用RT-PCR方法自正常成人外周血单核细胞中扩增出hIL-15 cDNA,将其克隆至T-vector中,经测序确证后,将该基因定向插入真核表达载体pcDNA3.1hisB中,脂质体法转染BEL-7402细胞进行表达,鉴定表达产物的生物学活性.结果:测序结果与已报道hIL-15cDNA序列一致.脂质体转染后获得6个BEL-7402细胞阳性克隆,IL-15活性测定为156～252u/ml.结论:成功地构建了真核表达载体pcDNA3.1hisB-IL-15,IL-15cDNA转导的人BEL-7402肝癌细胞可表达有生物活性的IL-15.
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