换一批
换一批应用抑制性消减杂交技术研究机体获得热适应后肝脏细胞线粒体呼吸链相关基因的差异表达
SUPPRESSION SUBTRACTIVE HYBRIDIZATION FOR IDENTIFYING DIFFERENTIALLY EXPRESSED GENES OF MITOCHONDRIAL ELECTRON TRANSPORT CHAIN OF LIVER CELLS OF HEAT ADAPTATION RATS
摘要目的:研究机体获得热适应后肝脏细胞线粒体呼吸链相关基因的差异表达.方法:常规方法建立大鼠热适应模型,分别从正常大鼠及热适应大鼠肝脏细胞中提取总RNA并抽提mRNA,按照SSH常规操作方法,构建cDNA消减文库,筛选阳性克隆并加以鉴定以得到带有差异表达基因的克隆.结果:成功构建具有高消减效率的热适应大鼠肝脏细胞cDNA消减文库,筛选鉴定后发现6个克隆含有差异表达基因.测序结果显示其中3个分别为热休克蛋白基因Hspel、线粒体细胞色素氧化酶C亚单位和NADH脱氢酶亚单位Ⅲ基因ND3.结论:三种基因的差异表达证明了线粒体呼吸链功能的增强在细胞的代偿功能中的重要作用,线粒体在热适应时动物体对高温的代偿性反应中发挥着参与热耐力形成、提高机体抗热损伤能力的重要作用.
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