换一批
换一批转录激活因子AP-2β基因的克隆、表达及其抗体的制备
CLONING,EXPRESSION OF HUMAN TRANSCRIPTION FACTOR AP-2β GENE AND PREPARATION OF ANTI- AP-2β ANTIBODY
摘要目的:克隆、表达与纯化出AP-2β蛋白质,并用所表达的蛋白质制备出抗AP-2β的抗体.方法:将AP-2β基因插入到表达载体pGEX-4T-1谷胱苷肽-S-转移酶基因下游,所得克隆经测序,以确定其阅读框码的正确性,然后用正确的克隆质粒转化E.coli BL21,用异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,而后用谷胱苷肽琼脂糖-4B纯化所表达的融合蛋白质.通过凝胶迁移率变动分析实验(EMSA)测得蛋白质的生物学活性,所得蛋白质用于制备抗体.结果:得到一条大约78 KD的蛋白质,并且成功的制备了抗体,所得蛋白质和抗体均具有很好的生物学活性.结论:我们成功的表达出转录激活因子AP-2β并制备出抗AP-2β的抗体,为一下步对AP-2β的功能进行研究打下了良好的基础.
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关键词
AP-2β基因GST表达系统融合蛋白基因表达抗AP-2β抗体The AP-2β GeneGST Expression SystemFusion ProteinGene ExpressionAnti-AP-2β Antibody
分类号
Q591.2
栏目名称
论著
DOI
10.3969/j.issn.1005-8982.2003.18.004
发布时间
2003-11-28
基金项目
国家自然科学基金
湖南省自然科学基金
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