换一批摘要目的克隆人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis-inducing ligand,Trail)基因,并在原核细胞中进行有效表达及纯化后,获得有生物活性的Trail蛋白.方法采用RT-PCR,从激活的人淋巴细胞中扩增Trail胞外区cDNA,将其克隆至载体pGEM-T中,经酶切和测序后,亚克隆构建重组原核表达载体pGEX-5X-Trail,转化大肠杆菌(HBl01),并进行表达和纯化.结果得到了Trail基因,构建了在HB101中表达的重组质粒pGEX-5X-Trail,纯化后,检测发现重组人Trail融合蛋白(rhTrail)对人肝癌细胞株HepG2有诱导凋亡的作用.结论该文成功地构建了人Trail基因高效表达系统,所表达的rhTrail具有良好诱导肿瘤细胞凋亡的活性,为今后的深入研究打下基础.
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DOI
10.3969/j.issn.1005-8982.2004.03.025
发布时间
2004-06-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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