换一批
换一批人系膜细胞中组织金属蛋白酶抑制剂1基因的稳定表达
Culture of human mesangial cell and constitution of cell strain stably expressing TIPM1 gene
摘要目的建立自体肾系膜细胞作为靶向载体转导外源基因的方法,使组织金属蛋白酶抑制剂1基因在肾系膜细胞稳定表达.方法选择性DMEM培养液培养的肾活检组织系膜细胞,构建重组真核表达载体pcDNA3-TIMP1进行体外转染,G418筛选阳性克隆,RT-PCR确认.结果建立了人肾穿刺组织系膜细胞培养方法,经组织学和免疫组化鉴定系膜细胞,成功构建表达组织金属蛋白酶抑制剂1基因的重组真核表达载体pcDNA3-TIMP1,筛选得到一个稳定表达的阳性克隆.结论肾活检组织系膜细胞培养条件的建立为肾病的基因治疗提供了一种有效载体,稳定表达组织金属蛋白酶抑制剂1基因的肾系膜细胞株为研究TIMPI在肾脏病中的作用提供良好的模型.
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