三种细菌生物被膜中超广谱β-内酰胺酶的检测

Detection of extended - spectrum β - lactamases in three kinds of bacterial biofilm

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摘要目的检测肺炎克雷伯菌、大肠杆菌、铜绿假单胞茵三种细菌的生物被膜(Biofilm,BF)中超广谱β-内酰胺酶(Extended-spectrum β-lactamases,ESBLs)的产生.方法用改良平板培养法在硅胶膜上建立肺炎克雷伯菌、大肠杆茵、铜绿假单胞茵BF的体外模型.用银染法及扫描电镜对BF进行鉴定.用双纸片试验检测ESBLs,等电聚焦电泳测定β-内酰胺酶的等电点.结果三种细菌的各30株中,BF肺炎克雷伯菌组(A2组)中ESBLs的产生率最高,为14株(46.7%),其浮游茵组(A1组)检出8株(26.7%);BF大肠杆菌组(B2组)其次为10株(33.3%),其浮游菌组(B1组)检出6株(20.0%);BF铜绿假单胞茵组(C2组)为3株(10%),其浮游组(C1组)为2株(6.7%).浮游菌组中ESBLs的产生率低于BF茵组,其中肺炎克雷伯菌及大肠杆菌的BF组和浮游茵组的检出率之间有显著差异,P＜0.05.A2组共检出14株产生ESBL,有4种ESBL,等电点分别为8.2(4株)、7.6(8株)、6.3(1株)和5.6(1株),A1组检出8株产生ESBLs,为3种ESBLs,等电点分别为8.2(2株)、7.6(5株)和5.6(1株);B2、B1组检出2种相同等电点分别为7.6(B1组4株,B2组6株)、8.2(B1组2株,B2组4株)的ESBLs;C1、C2组检出1种等电点为6.4的ESBLs(C1组2株,C2组3株).以pI为7.6的β-内酰胺酶的检出率为最高,其次是pI为8.2的酶.结论BF肺炎克雷伯茵比BF大肠杆菌、铜绿假单胞菌更易产生ESBLs,检出的ESBLs以SHV型为主.