换一批
换一批沙眼衣原体ompA基因克隆及其在真核细胞中的表达
Cloning of ompA gene from Chlamydia trachomatis and its expression in eukaryotic cell
摘要目的克隆D型沙眼衣原体(Ct)ompA基因,构建真核表达重组质粒,转染真核细胞,为核酸疫苗的研制作准备.方法用PCR技术从D型Ct基因组DNA中扩增ompA基因片段,重组入pUCm-T克隆载体.将pUCm-T/ompA中的ompA外源基因片段经酶切、连接等反应,亚克隆入pcDNA3.1真核表达载体,进行序列分析和酶切鉴定后,运用脂质体将重组体pcDNA3.1/ompA转染HeLa细胞,免疫组化法观察目的的基因的表达.结果从D型Ct基因组DNA中扩增出特异的ompA基因片段;序列测定证实与GenBank登陆的D型Ct一致;重组质粒pcDNA3.1/ompA在HeLa中获得表达.结论Ct ompA基因能够在体外真核细胞表达,为进一步研究Ct致病机制及DNA疫苗的研究提供理论依据.
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分类号
R518.8
栏目名称
论著
DOI
10.3969/j.issn.1005-8982.2004.07.009
发布时间
2004-06-04
基金项目
Hunan provincal health department
Department of science and technology of Hunan province
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