换一批pcDNA3-Bfgf真核表达载体的构建和鉴定
Construction and identification of pcDNA3-basic fibroblast growth factor (bFGF) eukaryotic cell expression vector
摘要目的构建pcDNA3碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)真核表达质粒,为进一步开展bFGF基因治疗中枢神经疾病奠定基础.方法建立SD大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,经逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增脑细胞中bFGF基因;载体和RT-PCR产物经BamHI和EcoRI酶切,纯化,T4DNA连接酶连接,转化大肠杆菌,抗生素筛选重组质粒.结果 RT-PCR产物为649bp特异片段,pcDNA3咄FGF重组体菌落PCR产物为649 bp特异片段,测序分析为bFGF基因片段.结论经RT-PCR反应得到特异的bFGF基因片段,并成功构建了大鼠bFGF真核表达载体.
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主题词
成纤维细胞生长因子2(Fibroblast Growth Factor 2)聚合(Polymerization)克隆, 分子(Cloning, Molecular)基因(Genes)质粒(Plasmids)
分类号
R332
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1005-8982.2004.08.022
发布时间
2004-07-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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