换一批
换一批人源性肝细胞生长因子稳定转染细胞株的建立
Building of stably transfected cell strain on human hepatocyte DNA synthetic stimulating factor
摘要目的通过实验获得人源性肝细胞生长因子(hHDSSF)稳定转染细胞株,为重组产品的获得奠定基础.方法通过脂质体包裹重组质粒pcDNA3.1hisB-HDSSF转染Hela细胞,以G418筛选转染细胞;进而通过RT-PCR和Northerm Blot鉴定G418筛选后的单克隆抗性细胞株.结果重组质粒pcDNA3.1hisB-HDSSF转染Hela细胞后,第20天可见G418单克隆抗性细胞株的形成.G418抗性Hela细胞株RT-PCR扩增出600 bp左右的目的条带;Northem Blot获得了明显的阳性杂交影.结论我们的实验证实HDSSF表达重组体被成功转入Hela细胞,并稳定表达;从而获得了HDSSF稳定表达细胞株,为进一步研究HDSSF表达、蛋白纯化和测定其生物学活性奠定了基础.
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