制备牛心包去细胞基质的一种新方法

New method to acellular bovine pericardial material

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摘要目的制备牛心包去细胞基质,寻找-种细胞清除率高,而对生物材料机械性能影响小的理想去细胞方法.方法新鲜牛心包作对照组,实验组用新洁尔灭-核酸酶-脱氧胆酸法对新鲜牛心包去细胞处理.牛心包片HE染色,光镜下观察并计算去细胞百分率,作WT+VG染色观察胶原纤维和弹力纤维排列;透射电镜观察超微结构;分别测定牛心包的组织含水量、厚度、抗拉强度、断裂伸长率、热皱缩温度.用Lowry法测定牛心包可溶性蛋白含量.结果牛心包去细胞处理后可溶性蛋白含量[(2.30±O.36)mg/gl]显著少于对照组[(13.74±1.27)mg/g](P＜0.01);细胞清除率达95%以上.组织学及超微结构观察:实验组心包无细胞成分,胶原纤维结构无破坏,排列整齐,结构紧凑;实验组牛心包厚度-(0.209±0.066)mm]、抗拉强度[(17.08±3.91)N/mm2]、断裂伸长率[(41.27±6.45)%]及热皱缩温度[(68.94±0.75)℃]与对照组-分别为(0.247±0.055)mm;(17.97±4.77)N/mm2;(42.67±7.76)%,(69.44±0.57)℃]差异均无显著性(P＞0.05).与对照组(83.02±0.43)%相比去细胞处理后含水量(86.34±0.71)%明显增加(P＜0.01).结论牛心包去细胞基质是一种优良的组织工程生物材料.新洁尔灭-核酸酶-脱氧胆酸法是一种快速、有效、实用的去细胞方法,去细胞彻底,对组织结构无破坏,对机械性能无明显影响.