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罗丹明123及P-糖蛋白在人支气管损伤修复过程中的表达

Study of Rhodamine 123 staining and P-glycoprotein expression of human bronchial epithelium during wound-repair process induced by fluorouracil

摘要目的研究离体人支气管上皮经氟尿嘧啶(5-FU)损伤前后及修复过程中罗丹明123(Rh123)的染色及p-糖蛋白的表达情况.方法取5-FU作用前后及修复3、6、24h的人支气管上皮,进行如下实验:采用酶消化法获取细胞悬液,Rh123染色,流式细胞仪分析;用免疫荧光及蛋白印迹法观察P-糖蛋白的表达,RT-PCR法检测P-糖蛋白mRNA的表达.结果5-FU作用后支气管上皮中Rh123阴性染色细胞占活细胞的比例较正常组增多;随着损伤的修复,Rh123阴性活细胞所占比例逐渐降至接近正常.免疫荧光法可见5-FU作用后的上皮细胞涂片上有P-糖蛋白的表达,在蛋白及mRNA水平,5-FU作用后支气管上皮的P-糖蛋白表达均较正常组增加.结论5-FU作用后,Rh123染色阴性、表达P-糖蛋白的支气管干细胞占残留活细胞的比例增多,由它们完成损伤的修复.

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