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平行平板流室内不同血流状态下内皮细胞紧密连接的变化

Changes of tight junction of cultured endothelial cells under different flow condition in parallel plate flow chamber

摘要目的研究不同血流状态下培养内皮细胞紧密连接的变化.方法设计一种新的平行平板流室模型,高速摄像微粒子示踪技术流体分析,培养内皮细胞进行7H6免疫荧光染色,F-肌动蛋白荧光染色和ZO-1双重免疫荧光染色,激光共聚焦显微镜观察.结果液体在入口与狭窄开始处中点的流速为249.8mm/sec,剪切应力为71.9dyn/cm2;进入狭窄段时的流速为316 mm/sec,剪切应力为88.5 dyn/cm2,上述区域液体为定常流.F-肌动蛋白纤维表达明显增加,呈束状,与液流方向一致,细胞变为细长.ZO-1和7H6则位于细胞周围呈现连续、线状环形分布.液体进入宽广区域后液体流速明显减慢并在两侧形成涡流甚至停滞,流速为54.4~119.6mm/sec,剪切应力为15.6~34.4dyn/cm2,F-肌动蛋白纤维分布和排列无方向性,细胞轮廓成不规则多边形,ZO-1和7H6在细胞周围呈点状分布.结论低剪切应力更易导致动脉硬化.

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