以HBc颗粒为呈现载体的真核表达载体pcDNA3.1-HBcNhel的构建
Use HBc as carrier to construct expression-vector PCDNA3.1-HBcNhel
摘要目的构建含乙肝核心C基因的真核表达载体pcDNA3.1-HBcNhel,探索其作为DNA疫苗载体的可能性.方法采用分子克隆技术在原核表达质粒pTrc-core的HBcAg el-loop处添加NheI酶切位点,双酶切此重组载体pTrc-coreNhel及真核表达载体pcDNA3.1,产物经纯化、T4DNA连接酶连接,连接产物转化大肠杆菌DH5α,筛选抗Amp+克隆并提取质粒进行酶切及PCR鉴定.结果成功构建了真核表达质粒pcDNA3.1-HBcNhel.结论该重组质粒可作为治疗性及预防性疫苗的候选载体,为深入研究预防性及治疗性疫苗奠定了基础.
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