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首页 > 中国现代医学杂志 > 与排异反应相关基因克隆及其反义转基因载体构建

与排异反应相关基因克隆及其反义转基因载体构建

Cloning of rejection related gene and construction of antisense gene transferring vector

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学术成果认领

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摘要目的克隆与排异反应密切相关的iNOS基因cDNA片段,并构建反义转基因载体.方法培养人血管内皮细胞HVEC细胞株,采用反转录-pCR方法获取iNOS cDNA基因片段,并克隆入T载体并进行序列分析.用HindⅢ与BamHI双酶切带有iNOS cDNA片段的T载体质粒与pCDNA5载体,回收酶切产物,连接,转化,提取质粒并酶切鉴定.结果RT-PCR获取了669 bp的iNOS基因片段;序列分析表明克隆的iNOS片段序列正确;双酶切分析显示克隆入pCDNA3载体的iNOS基因片段与预期的大小一致.结论克隆了iNOS基因片段,并构建了iNOS的反义转基因载体.

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作者李永奇 ^[1] 崔大祥 ^[2] 陈勇 ^[1] 韩锋产 ^[2] 学术成果认领

作者单位第四军医大学西京医院,综合诊疗中心,陕西,西安,710032 ^[1] 第四军医大学全军基因诊断技术研究所,陕西,西安,710032 ^[2]

关键词 iNOS基因排异反应反义转基因载体

主题词基因(Genes)转基因(Transgenes)方法(Methods)细胞(Cells)序列分析(Sequence Analysis)

分类号 Q782

栏目名称论著

DOI 10.3969/j.issn.1005-8982.2006.02.011

发布时间 2006-04-13

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2006年16卷2期

201-203,206页

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