换一批
换一批沙眼衣原体热休克蛋白10基因真核表达载体的构建及其在Hela细胞中的表达
Construction of eukaryotic expression vector for heat shock protein gene 10 of Chlamydia trachomatis and its expression in Hela cell
摘要目的从临床标本中获得沙眼衣原体(Ct)热休克蛋白(cHSP)10基因,构建真核表达重组质粒,利用脂质体体外转染Hela细胞,为研究cHSP10生物学功能和Ct核酸疫苗的研制做准备.方法用PCR技术从40例金标法阳性的临床标本中扩增cHSP10基因片断,重组入pMD18-T克隆载体.将pMD18-T/cHSP10外源基因片断经酶切鉴定后,克隆入pcDNA3.1(+)中,经过序列分析和酶切鉴定后,运用脂质体将该重组体转染Hela细胞,ELISA方法观察目的基因的表达.结果PCR扩增得到cHSP基因全长,大小为306bp,序列测定与GenBank(M58027)发布的序列一致;构建得到cHSP10基因真核表达载体;该真核表达载体在Hela细胞表达cHSP10.结论成功构建cHSP10基因真核表达载体,该重组质粒能在Hela细胞中表达cHSP10,为进一步研究cHSP10生物学功能和Ct核酸疫苗的研制提供了实验基础.
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关键词
沙眼衣原体热休克蛋白10基因真核表达载体基因表达Chlamydia trachomatiscHSP10 geneeukaryotic expression vectorgene expression
分类号
R392.2
栏目名称
论著
DOI
10.3969/j.issn.1005-8982.2006.05.002
发布时间
2006-05-11
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