摘要目的探讨一种简单易行的大鼠胰岛细胞培养方法,并寻求进行体外干预实验的最适条件.方法选用3、4周龄SD大鼠胰腺,用0.5 mg/mL的V型胶原酶逐级消化分离,80目尼龙筛网滤过消化产物后,加入含有11.1mmol/L葡萄糖的RPMI1640培养液内,进行体外培养.DTZ染色、利用抗胰岛素抗体进行免疫细胞染色.应用放射免疫技术对培养液上清液中的胰岛素进行检测和分析.结果胰岛细胞可以在体外培养2周以上.培养初期,细胞形态及分泌功能较稳定.DTZ染色β细胞胞浆着色,为均一的猩红色.Insulin抗体染色β细胞胞浆着色,经DAB显色为棕黄色.随培养时间延长,胰岛素分泌逐渐下降,培养7 d内,胰岛素分泌较稳定.结论改良后的大鼠胰岛细胞培养方法简单可靠,细胞培养至3~7 d时,适合用于体外实验研究.
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