换一批
换一批抗人大肠癌HCAb嵌合抗体在CHO细胞中的高效表达
High-level expression of human-mouse chimeric antibody HCAb against human colorectal cancer in CHO cells
摘要目的在CHO细胞中高效表达抗人大肠癌HCAb人-鼠嵌合抗体.方法从分泌鼠源单抗CAb的杂交瘤细胞中克隆、扩增可变区基因,测序鉴定后连入真核表达载体,转染二氢叶酸还原酶缺陷型中国仓鼠卵巢(dihydrofolate reductase-deficient Chinese hamster ovary,CHO-dhfr-)细胞进行表达.经G418及氨甲喋呤(MTX)梯度加压筛选进行嵌合抗体的高效表达,并用夹心ELISA方法测定嵌合抗体表达产量.结果采用RT-pCR、夹心ELISA等实验证实了所表达的抗人大肠癌HCAb嵌合抗体的人源性.培养上清中的抗体产量可达20mg/L.结论成功的实现了抗人大肠癌HCAb人-鼠嵌合抗体在CHO细胞中高效表达,为其进一步在大肠癌临床诊治中的应用奠定了基础.
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