换一批
换一批人卵透明带重组融合基因及其表达载体的构建
Construction of recombination human zona peiiucida3/GST fusion protion gene expression vector(四)
摘要目的 构建人卵透明带蛋白3(zona pellucida 3,ZP3)/GST蛋白融合基因原核表达载体.方法 利用PCR法扩增出去N端的信号肽和C端的跨膜区huZP3成熟蛋白编码基因.先将其克隆到pGEM-T载体,进行序列测定和分析,然后将huZp3核心DNA片断克隆入GST蛋白融合原核表达载体pGEX4T-1内.结果 获得一个核苷酸长度约为1000 bp的基因,与GenBank(NCBI:M60504)公布的Zp3基因序列有99%的同源性,DNA序列分析发现,有一个氨基酸出现变异.酶切鉴定后证明ZP3基因完整插入GST融合蛋白原核表达载体pGEX4T-1中.结论 成功构建出含ZP3基因的GST融合蛋白原核表达载体.
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