摘要目的 制备出PLGA纳米粒.并分析其DNA结合效率,对所结合质粒DNA的保护作用以及评价其体外基因转运效率.方法 制备PLGA纳米粒.测定PH值对DNA结合能力的影响,PLGA-NP与DNA结合的凝胶阻滞实验和DNA沉淀实验;通过PLGA-NP的DNaseI保护试验和血清保护试验判断其对所结合的质粒DNA的保护作用;用绿色荧光蛋白报道基因pEGFP-N1表达质粒评价其体外基因转运效率.结果 在中性(pH=7)条件下,DNA结合能力最强;当纳米粒与DNA比例达10:1时,DNA几乎完全结合到PLGA-NP上,结合效率达92%.PLGA-NP纳米粒中的DNA经DNaseI消化1h后或胎牛血清消化8h,仍然保持结构的完整、未被降解,而裸DNA在同样条件下即被完全降解.结论 PLGA-NP在中性(pH=7)条件下,DNA结合能力最强;纳米粒与DNA比例达10:1时,结合效率高,无细胞毒性.PLGA-NP与PcDNA16-53连接制备的PLGA-pcDNA16-53纳米粒,具有很好的抗核酸酶和抗血清消化能力.
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