MMP-2反义寡脱氧核苷酸对人膀胱癌 BIU-87细胞株侵袭能力影响的初步研究

Effects of matra metalloproteinases-2 antisense oligodeoxynucleotide on inhibition of invasion in human bladder cancer BIU-87 cell line in vitro

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摘要目的应用反义核酸技术,探讨阳离子脂质体介导的MMP-2反义寡脱氧核苷酸对膀胱癌细胞侵袭能力的影响.方法人工设计合成一段硫代修饰型互补于MMP-2的反义寡脱氧核苷酸序列(antisenes oligodeoxynucleotide,ASODN),并设计与其碱基组成相同,但碱基顺序随机排列的无义寡脱氧核苷酸序列(nonsense oligodeoxynucleotide,NS-ODN)作为对照.以阳离子脂质体介导将不同浓度的 ASODN及NS-ODN 转染至膀胱癌细胞系 BIU-87细胞中,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测转染前后BI-U-87细胞中 MMP-2 mRNA表达;以四甲基偶氮唑蓝(MTT)试验检测细胞的增殖能力;采用MTT比色法与transwell 小室侵袭试验相结合的方法测定肿瘤细胞的体外侵袭力.结果转染MMP-2ASODN可以显著降低 BIU-87 细胞中的 MMP-2 mRNA表达.MMP-2 ASODN处理细胞24 h,于1.0μmol/L的MMP-2ASODN浓度条件下即可显著抑制BIU-87 细胞的体外侵袭,而且这种抑制作用随ASODN 浓度的增加而增强.结论以MMP-2反义寡脱氧核苷酸阻遏MMP-2在膀胱癌BIU-87细胞株中表达可以成功地抑制BI-U-87细胞侵袭能力,提示应用反义核酸技术等方法抑制MMP-2活性可能可以应用于临床治疗膀胱癌.