换一批
换一批糖皮质激素对急性肺栓塞后肺组织内硫氰酸生成酶表达的影响
Effects of glucocorticosteroid on expression of rhodanase in lung tissues after acute PE
摘要目的 研究糖皮质激素对大鼠急性肺栓塞后肺组织内硫氰酸生成酶(rhodanase,Rho)表达的影响.方法 建立大鼠急性肺栓塞模型,分别在急性肺栓塞后1、8、24和48 h开胸取出肺组织.常规提取肺组织的总RNA和总蛋白,以正常组为对照,采取半定量RT-PCK和western blot方法 研究Rho在mRNA水平和蛋白水平的表达变化;采用免疫组织化学的方法 检测大鼠肺组织中Rho在肺栓塞前后表达的变化及其组织分布情况.在大鼠急性肺栓塞后48 h,采用RT-PCR和western blot方法 观察地塞米松(dexamethasone,DEX)对Rho蛋白表达的影响.分离培养原代大鼠气道上皮细胞,在培养液中加入50 ng/mL的共刺激因子IL-1β,TNF-α和IFN-γ,采用半定量RT-PCK,Western blot和免疫荧光染色的方法 观察1μM的DEX对上皮细胞Rho表达的影响,采用ELISA方法 检测上皮细胞IL-8和GM-CSF的表达.结果 大鼠急性肺栓塞后,Rho 的mRNA水平和蛋白水平均逐渐下降,免疫组化研究表明Rho主要分布在支气管粘膜上皮细胞,在急性肺栓塞后表达显著下降.DEX可显著提高Rho的肺内表达.大鼠气道上皮细胞在共刺激因子的作用下IL-8和GM-CSF的表达显著升高,DEX可明显抑制IL-8和GM-CSF的表达,但是Rho的表达显著升高.结论 大鼠急性肺栓塞后肺组织内Rho的表达明显下降,糖皮质激素可升高Rho的表达.离体实验证明糖皮质激素是通过抑制上皮细胞的炎症反应来提高Rho的表达.
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