换一批
换一批不同细胞因子组合对c-kit+Lin-细胞的体外扩增研究
In vitro expansion of c-kit+Lin-cells of bone marrow in presence of several cytokines
摘要目的 探讨在无血清无基质条件下,不同细胞因子组合对c-kit+Lin-细胞增殖效应以及最佳扩增时间.方法 采用免疫磁珠法分离小鼠骨髓c-kit+Lin-细胞,将干细胞因子(stem cell factor,SCF),FLt-3配基(FLt-3 ligand,FL),血小板生成素(thrombopoietin,TPO),白细胞介素-3(intedeukin,IL-3),肝细胞生长因子(hepatocyte graoth factor,HGF)等细胞因子进行不同组合,体外扩增干细胞14d,于不同时间检测细胞总数和c-kit+Lin-细胞数及比例,并在第10天通过细胞凋亡早期膜变化标记FIFT-Annexin-V,检测细胞凋亡率.结果 各组细胞因子均能显著扩增c-kit+Lin-细胞.扩增倍数3～19倍不等.在SCF+FL+TPO中加入IL-3或HGF,其效果更明显,c-kit+Lin-细胞在第6天分别扩增4.71和5.15倍,当同时加入时,两者有协同作用.其中SCF+FL+TPO+lL-3+HGF在第10天扩增程度最为显著,并且凋亡率最低为6.59%. 结论在体外短期培养过程中上SCF+FL+TPO+IL-3+HGF组合能产生大量的c-kit+Lin-细胞,并且最佳培养时期为第10天,为肝干细胞提供种子细胞.
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