重组人生存素单体分子与双体分子的原核表达研究
Prokaryotic expression of recombination human single and double molecular surviving
摘要目的 重组并高效表达人生存素单体分子和双体分子.方法 PCR扩增人生存素基因,将其单一读码框和双读码框重组到原核表达质粒栽体pKpL5的表达框内,限制性内切酶分析后,于42℃诱导表达.并以SDS-PAGE和Western blotting鉴定表达结果.结果 经限制性核酸内切酶分析,表达重组人生存素单体分子质粒pKpL5-sSURVIVIN和表达人生存素同源双体分子质粒pKpL5-dSURNIVIN均正确构建,可高效表达分子量约18.5KDa的人生存素单体分子与分子量约35KDa的同源双体分子,所表达的目的蛋白可被抗人生存素的多克隆抗体特异性识别.结论 该研究成功高效表达人生存素单体分子与同源双体分子,为进一步研究其生物活性与免疫原性奠定了物质基础.
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