纤维蛋白调节大鼠脑内皮细胞基质金属蛋白酶9的实验研究

Fibrin regulation of matrix metalloproteinases9 gene expression in rat brain vascular endothelial cells

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摘要目的观察纤维蛋白与大鼠脑血管内皮细胞共培养对(matrix metalloproteinases9,MMP9)蛋白及转录水平表达的动态变化.方法大鼠脑血管内皮细胞分离后培养,融合良好后.与不同溶度的纤维蛋白共培养,应用酶联免疫方法(ELISA)定量检测MMP9抗原浓度和Real-time PCR半定量检测MMP9 mKNA.结果纤维蛋白可以特异性诱导大鼠脑血管内皮细胞表达MMP9;不同浓度的纤维蛋白与大鼠脑血管内皮细胞共培养24 h,1.0 mg/mL上清液组的MMP9抗原浓度显著增高(P<0.001);1.0 mg/mL纤维蛋白与大鼠脑血管内皮细胞分别培养0、2、4、8、24和48 h,MMP9浓度在共培养2 h已经升高,8 h时显著升高,在24 h仍然保持在显著升高表达水平(P<0.005),48 h有所下降;不同浓度的胶原蛋白与大鼠脑血管内皮细胞共培养24 h引起MMP9抗原浓度轻度增高,但是在高浓度组明显低于对应浓度的纤维蛋白组引起的MMP9抗原浓度增高(P<0.05);纤维蛋白与大鼠脑血管内皮细胞共培养,转录水平检测提示,MMP9 mRNA的上调呈现出剂量和时间依赖性模式.结论纤维蛋白是大鼠脑血管内皮细胞特异性激活剂,可以特异性的上调MMP9表达,在转录水平和蛋白水平均呈现为剂量和时间依赖性模式.