RNAi技术特异抑制HPV18E6基因表达的研究
Specific suppression of HPV18 E6 oncoprotein by short interference RNA in Hela cervical carcinoma cells
摘要目的 探讨利用RNAi技术研究靶向抑制宫颈癌细胞株Hela中HPV18E6的可行性.方法 根据哺乳动物SiRNA设计原则要求,利用T7 RNA聚合酶体外合成针对HPV18E6、E7的SiKNA.用2%的琼脂糖电泳鉴定、脂质体转染Hela细胞,分4组,A组:HPV18E6的SiKNA干预组;B组:HPV18E7的SiR.NA干预组;C:HPV18E6、E7的SiRNA干预组;D:基因组文库任意SiRNA为对照组.于转染48、72、96 h后,用免疫组化法测定HPV18E6蛋白的表达.结果 干预组A和c转染后48、72 h,HPV18E6的阳性表达明显减少,以72 h为明显,96h后表达无明显减少.而干预B组和对照D组的HPV18E6的阳性表达无明显改变.结论 靶向HPV18E6的SiRNA能特异瞬时抑制靶基因E6的表达,该方法将为宫颈癌预防和治疗提供新的策略.
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