换一批
换一批肾癌G250基因和hGM-CSF基因双顺反子表达质粒的构建及鉴定
Construction and identification of bicistronic eukaryotic expression plasmid containing G250 of renal carcinoma and hGM-CSF
摘要目的 应用分子生物学技术,构建pIG250-GM双顺反子真核表达质粒并进行测序鉴定.方法 从肾癌组织中提取总KNA,采用RT PCR技术扩增肾癌G250抗原的基因编码区序列,同时从质粒pORF-hGM-CSF中扩增出基因佐荆hGM-CSF,分别克隆到真核表达载体pIRES的多克隆位点A(MCSA)和B(MCSB)中,构建pIG250-GM真核表达质粒,并进行酶切鉴定.结果 酶切鉴定提示插入的基因片段大小分别为1.44kμ和0.47kμ,测序分析表明克隆的G250和hGM-CSF序列与GenBank上公布序列完全一致.结论 成功构建双顺反子表达pIGM-G250质粒,为研究G250-GMCSF基因负载的DC疫苗防治肾癌提供了必要的实验基础.
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栏目名称
论著
DOI
10.3969/j.issn.1005-8982.2009.08.015
发布时间
2009-06-19
基金项目
广东省医学重点专科基金
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