反义RNA逆转耐药肝癌基因工程细胞株多药耐药性的实验研究

Reversing effect of multidrug resistance in hepatocellular carcinoma engineering cell line with antisence RNA

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摘要目的通过重组腺病毒表达出mdr1基因的反义RNA,观察反义RNA对人肝癌基因工程细胞株HepG2/K多药耐药性的逆转效应.方法利用真核表达载体构建可以稳定表达mdr1基因和P糖蛋白的肝癌基因工程细胞株HepG2/K,通过腺病毒载体AdEasy系统生成重组腺病毒pAdEasy-GFP-ASmdr1,将此病毒感染HepG2/K,用KT-PCR检测mdr1 mRNA的表达强度,流式细胞仪检测细胞膜p-糖蛋白的表达和柔红霉素的蓄积率,HepG2/K细胞对阿霉素的耐药性用MTT法检测.结果 HepG2/R细胞感染重组腺病毒后,RT-PCK检测表明mdr1 mRNA表达下降,流式细胞仪检测证实P-gP表达下降和柔红霉素的蓄积率增加,MTT法表明HepG2/K细胞对阿霉素的IC_(50)从25μg/mL下降到3μg/mL.结论反义RNA通过抑制mdr1 mRNA和P-gp的表达.

作者李波 ^[1] 叶田 ^[2] 李德华 ^[3] 陈永兵 ^[4] 张孟瑜 ^[1] 贺凯 ^[1] 冯春红 ^[1] 陈星 ^[1] 徐松波 ^[1] 倪建彬 ^[1] 罗亮 ^[1] 夏先明 ^[1] 学术成果认领

作者单位 泸州医学院,附属第一医院肝胆外科,四川,泸州,646000 ^[1] 泸州医学院,附属第二医院中医外科,四川,泸州,646000 ^[2] 成都地奥制药集团有限公司基因工程药物研究室,四川,成都,610041 ^[3] 首都医科大学附属佑安医院肝胆外科,北京,100069 ^[4]

关键词多药耐药性多药耐药基因肝癌细胞株工程细胞株 multidrug resistance multidrug resistance gene hepatocellular carcinoma cell line engineering cell line

主题词细胞(Cells)基因(Genes)肝肿瘤(Liver Neoplasms)工程(Engineering)研究(Research)

分类号 R735.7

栏目名称论著

DOI 10.3969/j.issn.1005-8982.2009.19.007

发布时间 2010-01-18

基金项目

泸州医学院和四川省科技厅科研资助项目