摘要目的 建立一种简单的慢病毒栽体介导的同时沉默双基因的方法.方法 该研究在慢病毒载体的3'LTK区同时插入沉默两个基因p18和MAD1的shRNA(Small hairpin RNA),通过包装细胞293T和包装质粒包装成假病毒颗粒,感染NIH/3T3细胞.其沉默基因的效果用Western blotting来检测.结果 栽体构建成功,被感染的NIH3T3细胞中,p18和MAD1基因的蛋白表达被显著抑制.结论 该栽体构建方法操作简单,无需PCK,及多次连接反应,且可达到两种基因同时被稳定、高效沉默的目的 ,为相关研究提供了方便.
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