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miR375表达质粒构建及表达研究

Study of the miR375-expression plasmid construction

摘要目的 寻找一种高效、简便的构建表达miRNA质粒的方法.方法 该研究用PCR 方法直接从小鼠gDNA扩增了包含miRNA375(miR375)前体序列在内的一个126 bp片段以构建质粒pAAv-miR375.该研究用pAAV-miR375转染Hela细胞48 h后,用定量RT-PCR方法和Northern bloc检测Heh细胞中miR375的表达.结果 转染了pAAV-miR375的Hela细胞中有miR375的表达,而在转染了空质粒pAAV-MCS和未转染的Hela细胞中没有检测到miR375的表达.结论 该研究所构建的pAAV-miR375质粒能够表达miR-NA375.作者介绍的这一种构建表达miRNA质粒的方法比以往的方法更快速、高效、简便和保证序列的正确性.

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分类号 R-332
栏目名称 论著
DOI 10.3969/j.issn.1005-8982.2010.05.003
发布时间 2010-06-30
基金项目
国家重点基础研究发展规划(973计划) 国家高技术研究发展计划(863计划) 国家自然科学基金
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中国现代医学杂志

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