磁珠-流式细胞术检测肺结核患者Th1/Th2细胞因子
Cytokine bead assay for Th1 and Th2 cytokines in patients with pulmonary tuberculosisl
摘要目的 建立磁珠-流式细胞术检测肺结核病患者血浆中的Th1/Th2细胞因子,为结核病患者免疫监测提供一种快速和客观的方法.方法 按Th1/Th2细胞因子磁珠分析试剂盒说明书进行,Th1/Th2细胞因子标准品倍比稀释,50μL等体积混合的Th1/Th2细胞因子捕获磁珠加入检测管,依次加入50μL PE标记的检测试剂,50μL标准品或50μL待检样品震荡混匀,室温避光3 h,加1 mL洗液,200 g离心5 min,加300μL洗液悬浮磁珠,上流式细胞仪前各样品振荡3~5 s.采集流式图谱并用BD CBA software(version 4.0;BDBiosciences)软件分析,并换算成细胞因子浓度.结果 涂阳肺结核患者和涂阴肺结核患者血浆中IFN-γ显著升高,而IL-5显著降低;涂阳肺结核患者循环IL-10显著升高,涂阴肺结核患者循环IL-10含量绝对值升高,但差异无显著性.结论 与常规ELISA法相比,磁珠-流式细胞术检测细胞因子需更少的时间和样品.
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