血红素加氧酶-1小干扰RNA对人胃癌9811-P细胞体外侵袭的影响

Effects of Heme Oxygenase-1 small interfering RNA on invasion of human gastric cancer 9811-P cells in vitro

导出 LinkOut 学术成果认领

摘要目的构建血红素加氧酶-1(HO-1)小干扰RNA(siRNA)表达载体,观察HO-1 siRNA对人胃癌9811-P(GC9811-P)细胞体外侵袭转移能力的影响.方法设计HO-1 siRNA序列,构建其真核表达载体,在Lipofectamine 2000介导下转染GC9811-P细胞,通过Western-blotting及RT-PCR检测HO-1在蛋白及mRNA水平的表达变化.通过细胞划痕实验、Transwell小室实验观察GC9811-P细胞体外侵袭转移能力.结果成功构建了HO-1 siRNA表达载体,并命名为pEGFP-C1/HO-1-siRNA.获得成功转染HO-1-siRNA的GC9811-P细胞,mRNA及蛋白水平均显示HO-1在GC9811-P细胞中明显下降.细胞划痕实验结果显示转染了HO-1-siRNA组的GC9811-P细胞迁移不明显,而转染了阴性对照组细胞和未转染的空白对照组细胞大量迁移至划痕区.Transwell小室实验结果显示转染了HO-1-siRNA组的GC9811-P细胞穿膜数为(54.2±2.68),而转染了阴性对照组的细胞穿膜数为(83.2±5.71),未转染的空白对照组细胞穿膜数为(84.3±4.29),LSD-t检验分析各组间细胞穿膜数的差异,HO-1-siRNA组细胞穿膜数小于阴性对照组及空白对照组细胞穿膜数(P＜0.05).结论 HO-1在GC9811-P细胞体外侵袭转移中发挥着重要作用,HO-1-siRNA可抑制GC9811-P细胞体外侵袭转移能力.