换一批
换一批Huh7耐药肝癌细胞系的建立及其与SP细胞的关系
The establishment of chemoresistance cell line Huh7 and its relation with SP cell
摘要目的 建立多柔比星( doxorubicin,Dox)耐药人肝癌细胞系Huh7/Dox,初步探讨Huh7/Dox与侧群细胞(side population cell,Sp)的关系.方法 以Dox为诱导剂,采用低浓度反复间歇诱导法建立人肝癌耐药细胞系Huh7/Dox,用MTT法测定药物敏感性；最后将耐药细胞和亲本细胞分别行Hoechest33342染色,用流式细胞仪检测SP细胞含量;采用逆转录-聚合酶链反应和定量PCR检测干细胞标记分子(CD133,CD90,OCT4,Nanog)的表达变化.结果 成功建立Dox耐药细胞系Huh7/Dox,对Dox的耐药指数为15;Hoechest33342染色分析显示Huh7和Huh7/Dox中SP细胞含量分别为0.2％和1.3％；定量PCR结果显示Huh7/Dox干细胞标记CD133、CD90、OCT4和Nanog的mRNA水平显著增加.结论 建立了稳定的人肝癌耐药细胞系Huh7/Dox,Huh7/Dox耐药细胞中SP细胞的含量明显增加,提示与化疗耐药相关.
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