新生大鼠在高氧环境下肺成纤维细胞P16-RB-E2F1通路的改变
Variation of P16-RB-E2F1 signal pathway in lung fibroblasts of neonatal rats treated with hyperoxia*
摘要目的 探讨新生大鼠在高氧环境下肺成纤维细胞(lung fibroblasts,LF)P16-RB-E2F1蛋白信号传导通路的改变.方法 足月新生SD大鼠于生后12 h内分别持续吸入85%高氧和空气,于3、7、14和21 d随机处死动物,无菌条件下采集肺组织,进行LF细胞的原代培养,应用免疫组织化学、Western blotting法检测P16、RB、E2F1蛋白表达;Real-time PCR法检测其mRNA含量.免疫组织化学法检测磷酸化RB蛋白(p-RBser-795)表达.结果 高氧组与空气组相比,生后7d时高氧组P16蛋白及mRNA表达开始减少,E2F1表达增加(P<0.05),14d和21 d时P16蛋白及mRNA表达明显减少,E2F1表达则明显增加(P<0.01);各实验组LF的总RB蛋白表达无明显差异(P>0.05),生后7d时高氧组p-RB蛋白表达增加(P<0.05),14d和21 d时明显增加(P<0.01).结论 高氧可能通过肺成纤维细胞P16基因表达失活,导致RB蛋白磷酸化(Rb灭活),E2F1基因表达水平增加,LF过度增殖最终导致肺间质纤维化.
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