换一批
换一批摘要目的 建立永生化人子宫内膜HPV16型E6和E7基因诱导的腺细胞,以促进对其的细胞生物学、生长分化调节等方面的研究.方法 将质粒pcDNA3.1 (+)/HPV16E6E7转入腺上皮细胞中,G418筛选,WesternBlot检测目的基因的表达；用相差显微镜观察细胞变化；上机分析细胞周期.结果 转化后腺细胞形态无明显改变,相差显微镜下观察细胞贴壁较紧,为多边形或圆形,密集区域呈镶嵌状排列,阳性细胞灶胞浆被均染成棕黄色,胞核呈蓝色；转化后细胞倍增时间约为52.8h,对数生长期后细胞停止分裂增生,活性降低；转化后的细胞无凋亡峰出现,S期比例为33.23％,明显增加.与未转化细胞相比差异具有统计学意义.结论 转染HPV16E6、E7基因至体外培养的子宫内膜腺上皮细胞寿命明延长,得到了可以在体外传代30次以上的转化细胞；具有正常细胞的表型和生长特性,有较强的增殖能力却不具有致瘤性.
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